茶树类黄酮O-甲基转移酶基因的克隆及原核表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马成英

作者： 马成英;吕海鹏;林智;张悦;郭丽;谭俊峰

作者机构：

关键词： 茶树;类黄酮O-甲基转移酶;克隆;原核表达

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2013 年 46 卷 02 期

页码： 325-333

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆茶树(Camellia sinensis)的一个类黄酮O-甲基转移酶基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,为进一步研究其酶学特性和调控茶树中甲基化类黄酮物质的代谢机理奠定基础。【方法】采用同源克隆法,以从茶树叶片中提取的总RNA为模板,结合RT-PCR与RACE克隆技术获得该基因cDNA全长,测序正确后将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21并诱导表达。【结果】该基因cDNA全长为1 246 bp,其开放阅读框为1 077 bp,编码358个氨基酸,推测的蛋白分子量为40.2 kD,理论等电点为5.62;其核苷酸编码序列与葡萄和毛果杨的类黄酮O-甲基转移酶基因相似性分别为80%和81%;经IPTG诱导和SDS-PAGE检测,所构建的原核表达载体表达的融合蛋白与预期蛋白相符合。【结论】利用RT-PCR与RACE克隆技术从茶树叶片中克隆得到了一个类黄酮O-甲基转移酶基因,成功构建了原核表达载体,并使其在大肠杆菌中得到了高效表达。

分类号： S571.1

  • 相关文献

[1]茶树氧甲基转移酶基因的克隆及原核表达. 马成英,施江,吕海鹏,张悦,谭俊峰,郭丽,彭群华,林智. 2013

[2]茶树茉莉酸羧基甲基转移酶基因(CsJMT1)的克隆与表达分析. 曹克梅,杨春,郭燕,陈娟,李燕,梁思慧,林开勤,乔大河,陈正武. 2021

[3]茶树亲环素基因cDNA全长的分析鉴定与原核表达. 张亚丽,赵丽萍,马春雷,陈亮. 2007

[4]茶树黄酮醇合成酶基因的克隆与原核表达. 马春雷,陈亮. 2009

[5]茶树CsSMT基因的克隆、原核表达及植物超表达载体构建. 刘声传,鄢东海,周雪,曹雨,莫雪,胡伊然,周玉锋. 2016

[6]茶树CsSnRK2.1、CsSnRK2.2基因的克隆及在非生物胁迫中的响应. 张永恒,万思卿,陈江飞,王伟东,周天山,肖斌,杨亚军,余有本. 2018

[7]紫娟茶树miR828a靶基因WER的克隆及生物信息学分析. 刘悦,曲浩,尚卫琼,孙云南,田易萍,仝佳音,陈林波. 2020

[8]茶树WRKY转录因子基因CsWRKY57的克隆及表达分析. 郭俊红,王伟东,谷星,郭莎莎,高岳芳,杨亚军,肖斌. 2017

[9]树脂氢过氧化物裂解酶基因CsiHPL1的克隆及表达. 辛肇军,孙晓玲,张正群,陈宗懋. 2013

[10]茶树MADS-box家族基因AGL9的克隆及表达分析. 杨方慧,夏丽飞,孙云南,陈林波,田易萍,宋维希,梁名志. 2019

[11]茶树病程相关蛋白基因CsPR5的克隆及表达分析. 侯向洁,李喜旺,王玉春,于永晨,高宇,孙晓玲. 2018

[12]茶树冷胁迫诱导抗寒基因CBF的克隆与表达分析. 陈暄,房婉萍,邹中伟,王玉花,成浩,黎星辉. 2009

[13]茶树糖转运蛋白CsPLt基因的克隆与序列分析. 陈玫,夏丽飞,陈林波,蒋红旗,田易萍,包云秀,尚未琼. 2014

[14]茶树醇脱氢酶基因的表达特征及番茄遗传转化分析. 辛肇军,孙晓玲,陈宗懋. 2013

[15]茶树细胞周期蛋白基因的克隆与表达. 王新超,杨亚军,马春雷,金基强,马建强,曹红利. 2011

[16]茶树细胞色素P450基因CYP71A26与CYP71B34的克隆及差异表达特征分析. 单睿阳,林郑和,陈志辉,钟秋生,游小妹,陈常颂. 2018

[17]茶树亚硝酸还原酶基因CsNiR的克隆及表达分析. 张芬,王丽鸳,成浩,韦康,胡娟,张成才,刘圆,吴立赟,李海琳. 2016

[18]茶树丙氨酸氨基转移酶基因的克隆与表达分析. 白培贤,王丽鸳,韦康,阮丽,成浩,张芬,张成才. 2016

[19]茶树硫酸盐转运蛋白基因CsSUL3.5的克隆与表达分析. 胡玉荣,岳川,周超,黄玉婷,曹红利,郝心愿,王新超,曾建明. 2015

[20]茶树病程相关蛋白基因CsPR5的克隆及表达分析. 侯向洁,李喜旺,王玉春,于永晨,高宇,孙晓玲. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序