橡胶树HbTRXh5基因在酵母中的表达及抗逆性分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 吴双
作者: 吴双;逯锐琳;冯成天;袁坤;王真辉;刘进平;刘辉
作者机构:
关键词: 橡胶树;硫氧还蛋白;酵母表达系统;非生物胁迫;氧化胁迫;抗寒性
期刊名称: 生物技术通报
ISSN: 1002-5464
年卷期: 2024 年 40 卷 012 期
页码: 136-144
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】克隆橡胶树硫氧还蛋白基因HbTRXh5,分析其表达特性,探究其在非生物胁迫中的功能,为橡胶树抗逆性遗传改良提供基因资源。【方法】采用RT-PCR方法克隆橡胶树HbTRXh5基因,利用生物信息学方法分析其序列特性和系统进化关系。采用实时荧光定量PCR分析HbTRXh5基因在橡胶树各组织以及非生物胁迫下的表达。构建HbTRXh5基因酵母表达载体并转入酵母,比较转基因酵母和对照酵母在低温、盐和氧化胁迫处理后的存活差异。【结果】HbTRXh5基因编码区长354 bp,编码117个氨基酸。HbTRXh5含有硫氧还蛋白保守结构域和CGPC活性位点,属于h型硫氧还蛋白第I亚组。HbTRXh5在橡胶树各组织中均有表达,以胶乳中的表达量最高。低温、盐以及H2O2和甲基紫精诱导的氧化胁迫处理均能诱导HbTRXh5的表达。成功将HbTRXh5基因转入酿酒酵母INVSc1菌株中并诱导表达。同转pYES2空载体对照酵母相比,转HbTRXh5基因酵母在H2O2处理后具有更高的存活率。相反,在低温和盐胁迫处理后,转HbTRXh5基因酵母的存活率较对照酵母明显降低。【结论】橡胶树HbTRXh5的表达受低温、盐和氧化胁迫调控,酵母中表达HbTRXh5提高了重组酵母对氧化胁迫的抗性,但降低了对低温和盐胁迫的抗性。
分类号: Q943.2%S794.1
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