微小牛蜱Bm86基因的真核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李文卉

作者： 李文卉;罗建勋;殷宏;关贵全;马米玲;刘志杰;刘爱红;党志胜;高金亮;任巧云

作者机构：

关键词： 微小牛蜱;Bm86基因;毕赤酵母;真核表达

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 09 期

页码： 718-722

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR技术从微小牛蜱饥饿幼蜱破解物中扩增到Bm86基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K重组构建了重组表达载体pPIC9K-Bm86,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的68 ku重组Bm86蛋白,目的蛋白约占培养上清液中蛋白总量的32%以上,诱导96 h目的蛋白的表达量为0.36 mg/mL。

分类号： S852.746

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