马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王康

作者： 王康;董宽虎;孙彦;康俊梅;董洁;孟林

作者机构：

关键词： 马蔺;ISSR-PCR;反应体系;正交优化

期刊名称： 草地学报

ISSN： 1007-0435

年卷期： 2008 年 16 卷 06 期

页码： 39-43+48

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据正交试验设计原理,设计探索正交试验和细调正交试验以确定马蔺(Iris lactealPall.var.chinensis(Fisch.)Koidz)ISSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Pri mers、Mg2+4种因素对马蔺ISSR反应体系进行了优化,得到适合马蔺的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Pri mers 0.4μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模板DNA。通过对马蔺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为52℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究马蔺遗传多样性奠定了基础。

分类号： S54`S688.4

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