刺五加苷诱导大鼠间充质干细胞成骨分化的作用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄月

作者： 黄月;颜亮;崔向荣;龙春兰;周琴;田杰;朱静

作者机构：

关键词： 刺五加苷;成骨分化;骨髓间充质干细胞

期刊名称： 解放军医学杂志

ISSN： 0577-7402

年卷期： 2019 年 03 期

页码： 215-221

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的探讨刺五加苷诱导大鼠间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用。方法提取SD大鼠的BMSCs,培养3代后采用流式细胞术鉴定表面抗原CD45、CD29、CD90的表达;在经典成骨培养液中加入不同浓度的刺五加苷而分为9组:A组(1×10~(–4)mol/L),B组(1×10~(–5)mol/L),C组(1×10~(–6)mol/L),D组(1×10–7mol/L),E组(1×10~(–8)mol/L),F组(1×10~(–9)mol/L),G组(1×10~(–10)mol/L),H组(经典成骨组),I组(阴性对照组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力,反转录定量PCR(RT-qPCR)检测骨形成蛋白(BMP)表达情况,筛选出刺五加苷的最佳诱导浓度。以最佳诱导浓度培养12d后,RT-qPCR检测成骨分化相关基因Runt相关转录因子(RUNX)、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)的mRNA表达水平,Western blotting检测Notch跨膜受体蛋白1(Notch1)、毛发增强分裂蛋白(Hes1)的蛋白表达水平;第21天时行矿化钙结节茜素红染色。结果第3代BMSCs表面抗原符合干细胞鉴定标准。CCK-8检测结果显示,A、B两组在培养120h后明显抑制了BMSCs的增殖,后期培养中将舍弃A、B两组;而RTqPCR结果显示,添加有刺五加苷的C～G组中,E组BMP表达量最高(4.91±0.46),因此选择1×10~(–8)mol/L作为刺五加苷的最佳诱导浓度进行后续实验。RT-qPCR检测结果显示,E组OSX表达量(30.72±1.96)明显高于I组(1.02±0.27)和H组(9.99±0.59,P<0.05),BSP表达量(8.15±0.47)高于I组(1.09±0.31)和H组(6.03±0.8,P<0.05),OCN表达量(5.91±0.68)高于I组(1.18±2.91)和H组(3.05±0.53,P<0.05),RUNX表达量(1.99±0.09)虽高于I组(1.02±0.19),却低于H组(2.51±0.06,P<0.05)。Westernblotting检测结果显示,E组成骨诱导后Notch1表达量(4608±103)较I组(2638±308)高,却低于H组(5218±182,P<0.05),Hes1表达量(8885±17)较I组(6241±461)增高,却低于H组(12 289±629,P<0.05)。茜素红染色结果显示刺五加苷浓度为10–8mol/L时矿化钙结节多于经典成骨组,提示该浓度刺五加苷成骨诱导效果较经典成骨组更佳。结论刺五加苷能协同地塞米松促进BMSCs的成骨分化,其作用可能与Notch通路有关。

分类号： R285.5

  • 相关文献

[1]低强度聚焦超声通过瞬时受体电位M7促进骨髓间充质干细胞成骨分化. 姚欢,郑妍,李娅莎,赵丽,杨珂. 2018

[2]h1-calponin基因对五指山小型猪骨髓间充质干细胞体外成骨分化的影响. 何微,吴添文,黄雷,赵为民,夏颖,唐芳,牟玉莲,李奎. 2013

[3]全反式维甲酸抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化信号通路中Fosl1直接调控PPARγ2. 李清,邹丽影,曾嘉颖,陈洁,李廷玉,刘友学. 2017

[4]TNF-α对肿瘤微环境中BMSCs生物学特性的影响. 向中平,崔向荣,谭彬,田杰,朱静. 2018

[5]野猪骨髓间充质干细胞的分离培养与生物学特性. 马红,李忠秋,刘娣. 2014

[6]腺病毒介导的人端粒酶反转录酶牙周膜细胞系的建立. 孙贵军,秦晓东,王世琴,胡慧珍,陆笑颜,金佳佳,吴生荣,何祥一. 2019

[7]DLX1联合BMP9促进人骨肉瘤细胞向成骨分化. 吕凤香,康权,仇超,董姿杏,罗庆. 2017

[8]果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)过表达对骨肉瘤细胞恶性逆转并向成骨分化的影响. 谢圣男,康权,张遥,陈洁,罗庆. 2019

[9]TCDD致胎鼠腭裂模型中miR-381-3p下调抑制腭间充质细胞成骨分化的实验研究. 蒋亨,袁心刚,傅跃先. 2019

[10]靶向调控AKT/mTOR信号通路对骨肉瘤细胞MG63增殖、凋亡、自噬及成骨分化的影响. 张遥,康权,董姿杏,谢圣男,罗庆. 2018

[11]机械敏感离子通道Trpm7在LIPUS促进牙髓间充质干细胞成骨分化中的作用机制的研究. 姚欢,潘华锋,郑妍,章杰,李娅莎,吴梦云,杨珂. 2018

[12]敲低3-磷酸甘油酸脱氢酶靶向能量代谢逆转骨肉瘤恶性生物学的行为. 周红,康权,谢圣男,陈洁,石雨鹭,罗庆. 2022

作者其他论文 更多>>

微信小程序