秋茄KcRD22基因的克隆与功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄旭新

作者： 黄旭新;侯佩臣;丁明全;王美娟;邓澍荣;李妮亚;周晓阳;沈昕;陈少良

作者机构：

关键词： 秋茄;KcRD22;转基因烟草;抗盐性

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2011 年 30 卷 04 期

页码： 25-32

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本文以用200mmol/LNaCl处理24h后的秋茄幼苗为材料提取秋茄叶片总RNA,利用RT-PCR方法克隆获得KcRD22基因的全长cDNA,通过构建pCAMBIA-2300-KcRD22过表达载体,利用农杆菌侵染的方式获得过表达KcRD22的烟草转基因株系,并对转基因株系的耐盐性做出初步分析。实验结果显示:KcRD22基因的ORF长1131bp,编码1个等电点为9.07、分子量为39.8kD、由375个氨基酸组成的蛋白。PCR及RT-PCR鉴定结果表明,KcRD22基因已经分别整合到8株烟草的染色体中,并在两个株系中获得表达。对转基因烟草进行光合作用测定,结果显示100mmol/LNaCl处理显著降低了野生型烟草的净光合速率,而转基因植株叶片的光合作用受到的影响较小。盐浓度达到200mmol/L时,转基因植株及野生型烟草净光合速率都明显降低,但盐胁迫解除后,转基因烟草光合作用的恢复情况明显好于野生型烟草,说明KcRD22的过表达提高了烟草的抗盐性。本文初步确定了KcRD22基因对植物耐盐性的贡献,这为进一步深入研究该基因在耐盐机制中的功能奠定了良好基础。

分类号： S718.4

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