水稻几丁质酶的原核表达、复性及体外抑菌活性的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘宝业

作者： 刘宝业;梁国鲁;张增艳

作者机构：

关键词： 水稻几丁质酶基因;表达;蛋白质纯化;复性;体外抑制真菌活性

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2009 年 23 卷 03 期

页码： 369-374

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用RT-PCR反应,从纹枯菌诱导的水稻叶片cDNA中克隆了1个水稻几丁质酶基因RC7的全长编码序列(ORF)。通过亚克隆方法,RC7与原核表达载体pGEX-4T-1上的GST融合,构建成GST-RC7重组蛋白的原核表达载体pGST-RC7,然后,将其转化到大肠杆菌细胞中。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式高效表达的GST-RC7。经过洗涤、溶解(变性)、复性及纯化等处理,包涵体中GST-RC7蛋白得到溶解、复性和纯化。纯化的复性GST-RC7蛋白具有几丁质酶活性。对6种重要作物病原真菌进行体外抑菌活性分析的结果表明,RC7可显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯菌、小麦赤霉菌、棉花黄萎菌、烟草赤星菌的菌丝生长,说明RC7可作为上述植物病害抗性基因育种的重要基因。

分类号： S511

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