流感病毒RNA聚合酶串联亲和纯化方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李印

作者： 李印;邓国华;崔佳莹;于洋;丁睛薇;陈化兰

作者机构：

关键词： H5亚型禽流感病毒;RNA聚合酶复合体;串联亲和纯化

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2011 年 33 卷 11 期

页码： 841-844

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立流感病毒RNA聚合酶的串联亲和纯化方法,本实验由鸡胚尿囊液中提取病毒核酸,经过RT-PCR和常规PCR方法扩增禽流感病毒株A/Duck/Guangxi/35/01(H5N1)的PB1、PB2和PA的cDNA。分别将PB2基因连接于pcDNATAP载体中,PB1和PA基因连接于pcDNA3A载体中构建了pcDNA-35PB2TAP、pcDNA-35PB1和pcDNA-35PA重组质粒。将构建的真核表达重组质粒共转染293T细胞,经过串联亲和纯化方法获得流感病毒依赖RNA的RNA聚合酶复合体(RdRp)。利用RNA体外合成试验验证获得的RdRp具有生物学活性。

分类号： S852.65

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