小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 骆蒙

作者： 骆蒙;孔秀英;刘越;周荣华;贾继增

作者机构：

关键词： 小麦;白粉病;基因表达谱;cDNA文库;杂交筛选

期刊名称： 遗传学报

ISSN： 0379-4172

年卷期： 2002 年 29 卷 09 期

页码： 814-819

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 以抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler”BC5F4为材料 ,构建了白粉病菌诱导的普通cDNA文库和抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。分别对两文库进行了一定规模的测序 ,获得普通cDNA文库不重复ESTs 387条和SSHcDNA文库ESTs 76 0条。将获得的ESTs与GenBank序列进行了BLASTn、BLASTx同源性分析。结果表明 :在普通文库中 ,一些参与光合作用与核糖体构成等的基因出现频率较高 ,而获得的抗病相关基因则较少。消减文库在构建方法、抗病相关基因的富集等方面具有明显的优越性 ,是目前抗病基因表达谱研究中的较好方法。利用高密度点阵膜杂交技术对两文库的筛选结果表明 ,该方法具有相对简便易操作、杂交膜可反复使用等优点 ;但也存在mRNA及同位素用量大等问题。经筛选 ,消减文库中有 5 4 1%的功能已知ESTs为抗病相关基因 ,被证明参与了小麦抗白粉病反应

分类号： Q78

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