GH46家族壳聚糖酶酸碱耐受性的关键氨基酸位点的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 程伊梦

作者： 程伊梦;孙慧慧;刘淇;赵玲;曹荣

作者机构：

关键词： 壳聚糖酶;关键氨基酸位点;序列比对;酸碱耐受性;同源建模

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2022 年 002 期

页码： 48-56

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 壳寡糖具有多种生物活性，是目前仅知的唯一碱性寡糖，在食品、农业和生物医药领域应用广泛。壳聚糖酶可以特异性切割壳聚糖中的β-1,4糖苷键，形成不同聚合度的壳寡糖，因此，获得具有良好稳定性的壳聚糖酶是大规模酶法制备壳寡糖的关键。为了鉴定影响糖苷水解酶（Glycoside hydrolase, GH） 46家族壳聚糖酶酸碱耐受性的相关氨基酸位点，选取来自芽孢杆菌（Bacillus sp.） DAU101 （最适pH为7.5）的壳聚糖酶为模板，以来自芽孢杆菌的壳聚糖酶Csn-BAC为研究对象，综合同源建模和序列比对的方法，选取了4个候选位点并构建了4个突变体（V1:P68A; V2:A137G; V3:A203M;V4:H234E）。结果显示，与Csn-BAC相比，4个突变体的热稳定性均出现了不同程度的下降，而酸碱耐受性有了明显的提升。结果表明，选取的氨基酸位点对酸碱耐受性均产生了显著的影响，同时表明该策略在改造壳聚糖酶稳定性方面是一种有效的方法。

分类号： O636.1

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