一种改良的热酚法高效快速提取酿酒酵母总RNA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李维维

作者： 李维维;顿宝庆;王智;曲娟娟

作者机构：

关键词： RNA分离;酿酒酵母;热酚法;cDNA;荧光定量PCR

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2012 年 0 卷 12 期

页码： 163-166

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以酿酒酵母单倍体CE N.PK1与双倍体CEN.PK2为研究对象,利用改良热酚法,快速高效地提取酿酒酵母总RNA。结果显示应用该方法提取的酿酒酵母CEN.PK1和CEN.PK2的总RNA经分光光度计测定浓度为7.63μg/μL和3.77μg/μL,OD_(260/280)分别为2.10和2.04,OD_(260/230)分别为2.32和2.24,浓度与纯度均能达到后续分子生物学试验的要求。经PCR与荧光定量PCR检测,该方法提取的RNA无DNA污染,可作为PCR反应的模板,与Trizol方法提取RNA相比,该方法不仅浓度高并且可将提取时间由常规的2.5 h缩短为1.5 h,具有操作简单、高质、高效等优点,经多次试验证明,此方法同样适用于酿酒酵母总RNA的大量提取试验,有较高的实用价值。

分类号： Q78

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