鸭β-防御素5基因的分离、鉴定及其生物学作用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张可心

作者： 张可心;蔺利娟;韩宗玺;邵昱昊;刘胜旺;马得莹

作者机构：

关键词： 鸭AvBD5;重组蛋白;抗菌活性

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2011 年 38 卷 11 期

页码： 1688-1697

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为克隆与表达鸭β-防御素5(AvBD5)基因及测定其生物学特性,采用RT-PCR方法从鸭肺脏组织中扩增到鸭AvBD5,将测得的序列与已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素的氨基酸序列构建进化树进行同源性分析。结果显示鸭AvBD5 cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸残基,内含6个位置保守的半胱氨酸残基,分别在分子内形成Cys1-Cys5、Cys2-Cys4和Cys3-Cys6共3对二硫键,与鸡AvBD5氨基酸同源性高达97%。进一步将其亚克隆到大肠杆菌pGEX-6p-1载体中进行原核表达。重组GST融合蛋白经纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响,以及该重组GST融合蛋白对溶血活性的影响。鸭AvBD5重组蛋白分子量约为32 kD,具有良好的抗菌活性,对11种细菌均有不同程度的抑制作用,高盐浓度对其抗菌活性有一定影响。此外,该重组蛋白对红细胞溶血活性极低。

分类号： S852.4`S834

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