烟草拟茎点霉快速检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 邢国珍
作者: 邢国珍;孙帅;李旭;邱睿;程琨;李博;陈佳敏;何雷;李淑君;郑文明
作者机构:
关键词: 烟草;拟茎点霉;特异性引物;分子检测
期刊名称: 烟草科技
ISSN: 1002-0861
年卷期: 2022 年 012 期
页码: 19-24
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为实现烟草拟茎点霉的快速准确检测,利用真菌rDNA-ITS通用引物对拟茎点霉和其他10种烟草病原菌基因组DNA进行了PCR扩增、片段回收及DNA测序,在序列比对基础上设计了两对特异性检测引物,并鉴定了引物的检测灵敏度和特异性,同时优化建立了PCR反应体系。结果表明,在退火温度为60℃时,两对特异性引物P2F/P3R和P3F/P3R从烟草拟茎点霉DNA样本中分别扩增出来420 bp和381 bp的特异性条带,而在其他10种烟草病原菌DNA以及阴性对照中均不能扩增到任何条带。两对特异性引物的检测灵敏度均达到10 pg/μL。建立的基于两对特异性引物P2F/P3R和P3F/P3R的分子检测方法可实现对病原菌烟草拟茎点霉的快速准确检测。
分类号: S435.72
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