重组猪瘟病毒E2基因逆转录病毒载体的构建及其表达活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 田宏

作者： 田宏;刘湘涛;林彤;吴锦艳;龚真莉;郑海学;代兴国;孙世琪;尚佑军;谢庆阁;张彦明

作者机构：

关键词： 猪瘟C株E2基因;重组逆转录病毒载体;PK15细胞;基因表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2007 年 27 卷 04 期

页码： 460-463

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从实验感染兔脾组织中提取总RNA,应用RT-PCR得到了CSFV C-株结构蛋白E2基因,定向克隆于逆转录病毒载体pBABEpuro,经PCR、酶切和序列分析鉴定,获取阳性重组质粒。将该重组质粒与水疱性口炎病毒载体pVSV-G共转染GP2-293细胞,收获假型病毒,并在Polybrene的介导下感染PK15细胞,嘌呤霉素筛选表达猪瘟E2基因的细胞株。通过细胞传代并结合PCR、免疫荧光及ELISA检测表明,所筛的细胞细胞系能稳定表达猪瘟E2基因,而且表达产物具有良好的生物学活性。

分类号： S852.65

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