利用醋酸锂和DTT对毕赤酵母进行电击前处理提高外源基因转化效率

文献类型: 中文期刊

第一作者: 黄燕

作者: 黄燕;徐梅倩;高兴春;何国声;朱顺海;曹杰

作者机构:

关键词: 巴斯德毕赤酵母;高效转化;G418筛选

期刊名称: 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集

ISSN:

年卷期: 2006 年

页码: 2

收录情况: CSCD

摘要: 巴斯德毕赤酵母是近年来成功的外源基因表达系统之一,已经表达出众多外源蛋白.它既能像原核生物一样快速生长、高密度发酵,又能进行真核翻译后修饰,并且蛋白分泌表达量大,因此应用越来越广泛:高效转化外源基因是利用毕赤酵母表达的第一个关键步骤,通常转化效率越高,转入毕赤酵母中的外源基因的克隆数就越多,也就越利于高效表达.本文通过改变巴斯德毕赤酵母的前处理溶液来提高其转入的外源基因的克隆数。实验设立四个组,在其他条件不变的情况下.分别用灭菌去离子水、100mM醋酸锂、10mMDTT、100mM醋酸锂和10mMDTT混合液对毕赤酵母进行转化前处理,然后把每个组在MD平板上长出的阳性酵母菌株进行G...

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