H5N1禽流感病毒微磁粒捕捉系统和SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张坤

作者： 张坤;李刚;贾凤芹

作者机构：

关键词： H5N1禽流感病毒;微磁粒捕捉系统;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2009 年 29 卷 09 期

页码： 1144-1148

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用禽流感H1N1抗体包被微磁珠制备免疫磁珠,再通过抗原抗体反应得到了含有N1亚型的病毒,然后设计针对H5亚型的特异性引物,同时构建含有H5亚型HA基因部分序列的标准质粒,定量后作为模板,建立了可以检测H5亚型禽流感病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法。结果表明,制备的免疫磁珠可以吸附4个血凝单位的H5N1流感病毒和5个血凝单位的H1N1流感病毒,而对H9N2亚型流感病毒无特异性结合,从而可以富集N1亚型的流感病毒。H5亚型RRT-PCR检测灵敏度可达到4.6拷贝/μL,线性范围达5个数量级;特异性强,与NDV和H1、H9亚型禽流感病毒不发生交叉反应。因此,利用该方法可以很好地检测H5N1禽流感病毒。

分类号： S852.65

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