表达GFP和gpt基因的重组CVI988病毒的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邱亚峰

作者： 邱亚峰;葛菲菲;曹瑞兵;周斌;马志永;陈溥言

作者机构：

关键词： 马立克氏病病毒(MDV);转移载体;绿色荧光蛋白;转染;重组病毒

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 02 期

页码： 183-188

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以马立克氏病病毒(MDV)CVI988株基因组为模板,利用PCR技术扩增出约2.7和3.0kb的基因片段,将上述片段同时插入pUC19中,获得约5.5kb MDV同源重组臂;以该基因片段的US2区的BglⅡ为插入位点,分别插入基因表达盒CMV-gpt-ployA和CMV-gfp-polyA,构建转移载体pUS-gpt-GFP,将该载体瞬时转染CHO细胞,在荧光显微镜下,可以观察到绿色荧光蛋白的表达;将该转移载体转染已用MDV CVI998株感染的次代CEF细胞,利用MX-HAT培养基筛选重组病毒,并用荧光显微镜挑选表达绿色荧光蛋白的蚀斑,结果获得重组病毒rMDV gptGFP。通过PCR检测和病毒生长测定,证明重组病毒获得纯化。

分类号： S852.65

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