梨炭疽病菌原生质体遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杜艳

作者： 杜艳;刘永锋;常有宏;蔺经;乔俊卿;刘邮洲

作者机构：

关键词： 梨炭疽病菌;遗传转化;原生质体;GFP标记菌株

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2017 年 02 期

页码： 295-300

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立梨炭疽病菌的原生质体遗传转化体系,以梨炭疽病菌菌株II-17为供试菌株,研究了菌龄、酶解液组合及酶解时间等对梨炭疽病菌原生质体制备的影响。结果表明,制备梨炭疽病菌原生质体的适宜条件为:CM液体培养基培养分生孢子24 h后,再转接到新的CM液体培养基中培养24 h,获得新鲜的菌丝;最适酶解液组合为9.0 mg/ml裂解酶+1.0 mg/ml崩溃酶+1.0 mg/ml蜗牛酶;酶解时间为2.5~3.0 h时酶解效率最高。对获得的转化子进行PCR鉴定和荧光观察,结果表明,GFP标记基因已成功整合到梨炭疽病菌的基因组中,转化子发出强烈的绿色荧光且遗传性稳定。致病性测定结果表明,转化子致病性与野生型菌株无明显差别,成功获得了梨炭疽病菌的GFP标记菌株。

分类号： S661.2

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