表达重组鸡新城疫病毒免疫原蛋白基因的研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘惠莉
作者: 刘惠莉;刘洪云;曹殿军;孙凤萍;顾庆国
作者机构:
关键词: 鸡新城疫病毒;重组禽痘病毒;噬斑筛选;Southern杂交
期刊名称: 上海农业学报
ISSN: 1000-3924
年卷期: 1999 年 03 期
页码: 62-65
收录情况: CSCD
摘要: 以 N D V H N 基因重组禽痘病毒载体与禽痘病毒转染液为材料,以载体质粒的 Lac Z报告基因为筛选标记,在含有 Xgal的培养基上筛选蓝色空斑的阳性重组子,对初次筛选到的蓝色空斑经过三轮蚀斑纯化(蓝斑形成率达90% 以上),得到了能稳定增殖的病毒子;再分别提取病毒子感染细胞、正常对照细胞基因组 D N A, Bam HⅠ酶切后,以 D I G 标记的探针进行 Southern 杂交检测,发现重组病毒感染的细胞基因组 D N A 在7 kb 处有一 D N A 片段,能与 H N 特异性探针呈阳性反应,而对照细胞没有,从而利用 Lac Z报告基因、 H N 探针杂交检测,我们成功地筛选并获得了 N D V H N 基因重组禽痘病毒,为下一步的研究工作奠定了基础。
分类号: Q786`S852.65
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