应用酵母双杂交方法筛选与马传染性贫血病毒Rev 蛋白相互作用的蛋白

文献类型： 中文期刊

第一作者： 苏朝

作者： 苏朝;尹鑫;马建;王晓钧

作者机构：

关键词： 马传染性贫血病毒;Rev 蛋白;酵母双杂交cDNA 文库;马巨噬细胞

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2015 年 37 卷 4 期

页码： 315-317

收录情况： CSCD

摘要： 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)蛋白与马巨噬细胞蛋白之间的相互作用,本研究利用SMART技术构建了马巨噬细胞的酵母双杂交cDNA文库,并利用该文库调取与EIAV Rev蛋白相互作用的细胞蛋白,构建诱饵质粒pGBKT7-rev,通过表型检测Rev的自激活和细胞毒性作用,并与构建的文库进行杂交筛选。对获得阳性克隆进行序列测定和比对分析,根据分析结果进行共转化验证。结果显示,文库的容量为3×10~8 cfu/mL。Rev蛋白在酵母双杂交系统中无自激活现象和细胞毒性作用。此外,本实验共筛选得到5个与EIAV Rev相互作用的宿主细胞蛋白。本研究为进一步研究Rev蛋白的生物学新功能奠定了基础。

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