流行性乙型脑炎prM 蛋白剪切位点突变的prM-E蛋白表达细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李业南

作者： 李业南;陈振师;步志高;华荣虹

作者机构：

关键词： 流行性乙型脑炎病毒;prM蛋白;蛋白剪切;细胞系

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 3 期

页码： 189-192,201

收录情况： CSCD

摘要： 为建立稳定共表达乙型脑炎病毒(JEV)完整M前体蛋白(prM)和E蛋白的BHK-21细胞系,本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变,将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表达质粒pCAG-JEV-prM(R89A)E。将重组质粒转染BHK-21细胞,转染48 h后细胞用含G418的选择性培养基选择培养,进一步经细胞克隆纯化制备表达剪切位点突变的JEV prM-E蛋白的稳定细胞系。经IFA和western blot鉴定表明,该细胞系能表达JEV prM与E蛋白,所表达的prM蛋白未发生剪切;细胞经多次传代后仍能够稳定地共表达prM与E蛋白。该细胞系的建立为研究prM蛋白剪切对JEV粒子形成的影响以及亚单位疫苗的制备奠定了基础。

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