莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张海棠

作者： 张海棠;王自良;邓瑞广;钟华;范国英

作者机构：

关键词： 莱克多巴胺;人工免疫原;单克隆抗体;阻断ELISA;快速检测试剂盒

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2008 年 22 卷 06 期

页码： 166-170

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用混合酸酐法将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成免疫原BSA-RAC,并用紫外和凝胶电泳鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb。应用RAC mAb研制RAC残留快速检测阻断ELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为1∶24.5;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株的亲和常数Ka为1.65×1010L/mol。RAC-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为1~170μg/L,灵敏度为0.52μg/L,检测限为1μg/L,饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为91.1%和89.2%,平均批内和批间变异系数<15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率为22.3%,与其他化合物无交叉反应,RAC-Kit在4℃可保存180d。

分类号： S859.84

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