猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株与JXA1-R疫苗株荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 周新宇
作者: 周新宇;陈鑫鑫;乔松林;郭振华;李睿;邓瑞广;张改平
作者机构:
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;JXA1-R疫苗株;HNhx毒株;TaqMan荧光定量PCR;SYBR GreenⅠ荧光定量PCR;鉴别检测
期刊名称: 河南农业科学
ISSN: 1004-3268
年卷期: 2021 年 001 期
页码: 142-151
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株,根据类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株非结构蛋白2(Nsp2)基因序列差异,设计特异性引物和探针,建立TaqMan荧光定量PCR和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。结果显示,2种方法中,标准品在103~108拷贝/μL均具有良好线性关系,标准曲线R2值均在0.990以上;基于TaqMan探针法的荧光定量PCR方法,JXA1-R株、HNhx株的最低检出量分别为104、103拷贝/μL,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的最低检出量均为100拷贝/μL;重复性分析结果显示,批内和批间试验的变异系数均小于1.5%,呈现出良好重复性。综上,成功建立了鉴别检测类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株的方法,且稳定性好、特异性强,可以为PRRSV的鉴别检测提供技术支持。
分类号: S852.65
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