西马特罗杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备和鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 职爱民

作者： 职爱民;李青梅;刘庆堂;柴书军;赵丽娜;胡骁飞;杨艳艳;邓瑞广;张改平

作者机构：

关键词： 西马特罗;杂交瘤;单克隆抗体

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2010 年 24 卷 05 期

页码： 1011-1014+1031

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用重氮化法将牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别与西马特罗(CIM)偶联作为免疫原或包被原,用BSA-CIM免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-CIM包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原超强免疫;取脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌CIM单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备CIM mAb,对CIM mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-3;融合后筛选出3B11-H4、2A11-G11和4F5-F11共3株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800、1∶1600和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×106、1∶1.02×107和1∶2.56×107,3B11-H4株对CIM的IC50为0.40ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于0.2%。本试验获得了高效价、敏感、特异的抗CIM mAb,为CIM残留ELISA检测试剂盒和试纸条的建立奠定了坚实的基础。

分类号： S859.84

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