流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨耀武

作者： 杨耀武;齐香荣;陈德胜;何孔旺;陈溥言;沈国顺

作者机构：

关键词： 流行性乙型脑炎病毒;E蛋白基因;反转录-聚合酶链反应;克隆;表达;抗原性

期刊名称： 中国人兽共患病杂志

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2003 年 19 卷 05 期

页码： 31-35

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的　获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础。方法　根据已发表的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并将其克隆入 pET - 32a(+)表达载体中 ,构建重组融合表达载体pET -E ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,利用IPTG诱导获得高效表达。结果　扩增的E蛋白基因片段长 1113bp ,编码 371个氨基酸残基 ,该基因片段与国内发表的减毒株SA14 - 14 - 2碱基序列同源性为 10 0 %。表达产物分子量约为 6 2kD ,经Westernblotting分析表明表达产物具有较好的抗原性。结论　通过序列分析表明 ,我国的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株未发生基因突变。表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELISA早期诊断试剂盒的研制提供了依据。

分类号： R512.32

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