基于酶热稳定性系统计算的乳酸氧化酶热稳定性改造

文献类型： 中文期刊

第一作者： 华晨

作者： 华晨;李新新;涂涛;杨虹;罗会颖;陈家明;姚斌;柏映国;彭书传

作者机构：

关键词： 乳酸氧化酶;热稳定性;分子改造;ETSS

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2018 年 08 期

页码： 144-150

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 乳酸氧化酶能够催化乳酸氧化为丙酮酸,具有重要的工业应用价值,但已有研究表明,不同来源的乳酸氧化酶均存在热稳定性不好的问题,影响了其在工业当中的应用。目前对于乳酸氧化酶的研究报道较少,对其热稳定性的改造更未见报道,因此提高乳酸氧化酶的热稳定性具有重要意义。克隆表达了一个高比活乳酸氧化酶(Eg LOD),通过生物信息学辅助分析及表面电荷分析软件(ETSS)对乳酸氧化酶的蛋白结构进行理性分析,基于蛋白表面电荷分布优化设计了9个突变体尝试对其进行热稳定性改良。通过对突变体的筛选获得了两个有效提升热稳定性的突变体D250N,D281N,在60℃下处理30 min仍然能够保持50%以上的酶活,而野生型Eg LOD酶活仅剩20%左右。

分类号： Q55

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