猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邓宇

作者： 邓宇;张荣;丛雁方;张建武;袁世山;文心田;郑浩

作者机构：

关键词： 猪源牛病毒性腹泻病毒;实时荧光定量RT-PCR;TaqMan探针

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2011 年 42 卷 07 期

页码： 1046-1050

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立一种荧光定量PCR检测方法,用于猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDVs)检测,同时能鉴别诊断猪瘟病毒(CSFV)。根据BVDVs与CSFV 5′-UTR保守序列,设计一套引物和特异TaqMan探针,以本实验室构建的猪源BVDVs 5′-UTR阳性重组质粒为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线。以构建的标准品为模板进行了特异性、敏感性、重复性试验、并应用于临床检测。结果显示,该方法检测CSFV、猪繁殖与呼吸综合征病毒均为阴性;最低可检测到每个反应相当于10拷贝的标准品DNA;重复性试验的批内变异系数为0.20%～0.95%;应用所建立方法对临床样品进行检测,其结果与普通RT-PCR结果的符合率为86.7%。本研究建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于猪感染BVDVs、猪瘟疫苗污染BVDVs的监测。

分类号： S854.43

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