一种基于凝胶过滤层析的水疱性口炎病毒(VSV)的纯化方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙赫

作者： 孙赫;岳玉环;赵永坤;吴广谋;田园;张守峰;张国利;李泽鸿

作者机构：

关键词： VSV;凝胶过滤层析;Western blot;透射电镜;RT-PCR

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 1163-1167,1212

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究目的是开发出一套简单有效的水疱性口炎病毒（VSV）的纯化方法，该方法可为基于VSV的医用治疗平台相应的载体，也可为疫苗及溶瘤剂的研发提供一定的技术支撑和物质储备。选用BHK细胞作为VSV复制的载体，并通过显微镜观察细胞病变（CPE）的出现；应用凝胶过滤层析法对收获且处理过的病毒液进行纯化，包括第1轮饱和硫酸铵沉淀高盐除杂和第2轮以严格的吸收峰洗脱为特色的凝胶过滤层析的进一步纯化。通过SDS-PAGE、Western blot、ELISA、电镜验证等分析纯化产物的纯度和准确性。SDS-PAGE显示本方法明显除去病毒上清中大部分杂质；Western blot、ELISA、电镜证实纯化产物是VSV病毒。经使用Reed-Muench法计算病毒的半数组织细胞感染量(TCID50)效价为10-2.72,RT-PCR的方法鉴定毒株为印第安纳毒株（Indiana, IN）。上述结果表明，本研究成功研制出一套方便、高效、简易的VSV纯化方法，为VSV的纯化和使用提供了参考依据。

分类号： S852.65

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