猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋岩

作者： 宋岩;师东方;樊琛;刘胜旺;魏华;李一经

作者机构：

关键词： 猪轮状病毒;vp4基因;主要抗原编码区基因;克隆;真核表达

期刊名称： 中国病毒学

ISSN： 1003-5125

年卷期： 2005 年 01 期

页码：

收录情况： CSCD

摘要： 本研究扩增猪轮状病毒中国分离株 JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1 756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得 vp4 基因的表达,对表达的 VP4 蛋白进行 Western blot分析和血清中和抗体试验。结果表明:JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株 CRW 8 株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96.43%和67%,说明 JL94株与 CRW 8 株属同一 VP4 血清型,而与 Gottfried株属不同血清型。JL94 株VP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于 aa81 aa207。vp4 基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的 20%,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性。所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断 JL94 在 MA104 细胞上引起的细胞病变。

分类号： S852.65

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