猪鼻支原体热不稳定延伸因子黏附宿主细胞机制的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李瑶

作者： 李瑶;王佳;邵佳;于岩飞;袁厅;刘蓓蓓;冯志新;邵国青;屠志刚;熊祺琰

作者机构：

关键词： 猪鼻支原体;热不稳定延伸因子;黏附;纤溶酶原;细胞外基质

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN：

年卷期： 2022 年 009 期

页码： 990-995

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究热不稳定延伸因子（EF-Tu）在猪鼻支原体（Mhr）与宿主互作中的功能，本研究构建了重组质粒pET-EF-Tu并经PCR鉴定正确后，转化BL21（DE3）大肠杆菌后，通过IPTG诱导表达、镍柱亲和层析纯化获得纯化的重组蛋白rEF-Tu。将重组蛋白免疫家兔制备高免血清，采用ELISA方法检测其效价。利用该免疫血清通过western blot和菌落免疫杂交的方法分析EF-Tu在Mhr表面的表达情况，ELISA结果显示制备的多克隆抗体效价达1:200 000以上，且r EF-Tu可表达于Mhr表面；通过间接免疫荧光试验和微孔板黏附试验检测rEF-Tu对猪肾细胞（PK-15）的黏附能力，结果显示rEF-Tu具有黏附能力且该黏附作用具有剂量依赖性；进一步利用微孔板的方法检测r EF-Tu蛋白结合于纤溶酶原和细胞外基质成分的能力，结果表明rEF-Tu蛋白可结合于宿主纤溶酶原以及不同的细胞外基质成分（纤连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白和玻连蛋白）。本研究结果表明EF-Tu可于Mhr表面表达、可黏附宿主细胞，并可结合纤溶酶原和多种细胞外基质成分，在Mhr的感染及致病中可能具有重要功能。

分类号： S858.28

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