大豆球蛋白A3酸性多肽的原核表达及B细胞表位分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘宾

作者: 刘宾;滕达;杨雅麟;王建华

作者机构:

关键词: 大豆球蛋白;A3酸性多肽;原核表达;B细胞表位

期刊名称: 中国食品学报

ISSN: 1009-7848

年卷期: 2012 年 12 卷 03 期

页码: 13-20

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 人工合成大豆球蛋白A3酸性多肽基因cDNA序列,构建原核表达载体pET30a-A3,将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21后用IPTG诱导表达,经His亲和层析纯化,获得纯度约91%融合A3蛋白。Western blotting显示,所获得的A3融合蛋白可与对豆粕过敏的仔猪血清发生免疫反应,表明所得融合蛋白具有免疫活性。利用Lasergene7.0中Protean软件对A3蛋白氨基酸序列进行B细胞抗原表位预测和分析,推测其中97~113、156~160、169~176、186~193、271~284和295~312氨基酸区段是A3酸性多肽的B细胞抗原表位,其中169~176区段的平均抗原指数最高,表位抗原性最强。本结果为进一步研究该蛋白致敏机理及单抗制备奠定了初步基础。

分类号: TS201.21

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