猪圆环病毒2型亲和肽双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郝俊芳

作者： 郝俊芳;黄凯;崔艳艳;王冠;马冰冰;王方雨

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;亲和肽;双抗体夹心ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 53 卷 011 期

页码： 1371-1376

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亲和肽的病毒亲和性,建立双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证.利用本实验室制备的PCV2 6A5单抗作为捕获抗体,以期固定PCV2,采用方阵滴定法确定双抗体夹心ELISA法中各组分的最佳工作浓度和条件,并对方法进行最低检测限、灵敏度、特异性和重复性验证.结果显示,捕获抗体最佳工作浓度为25 μg/mL,PCV2病毒液按1∶80稀释,亲和肽最低检测限为0.5 μg/mL;特异性试验结果显示,与猪瘟病毒E2蛋白的5条亲和肽无交叉反应;重复性试验结果显示,批内重复性为3.73%~8.51%,批间重复性为3.93%~7.88%.上述结果表明,建立的猪圆环病毒2型亲和肽双抗体夹心ELISA检测方法特异性、灵敏度、重复性良好,可为PCV2亲和肽的筛选鉴定提供技术支撑.

分类号： S852.659.2

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