牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王姝

作者： 王姝;朱远茂;蔡红;马磊;史鸿飞;吕闯;董秀梅;高欲燃;薛飞

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;E2;单克隆抗体;IgM

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2013 年 33 卷 004 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)糖蛋白E2单克隆抗体(MAb),利用原核表达并且纯化的重组糖蛋白E2(rE2)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用以BVDV为检测抗原的间接ELISA筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得2株稳定分泌抗E2特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为4E3与1G11.用4E3与1G11杂交瘤细胞株接种BALB/c小鼠制备腹水,采用rE2及BVDV包被的ELISA测得的效价分别是6.21*106和6.83*105及6.83*105和7.5*104.间接ELISA、Western blot、IFA试验表明两株杂交瘤细胞所分泌的MAb具有良好的反应性和特异性.经抗体亚类鉴定4E3与1G11均为IgM/κ.特异性试验表明4E3与1G11这2株MAb均不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛腺病毒3型反应;其中4E3不与猪瘟病毒反应,而1G11则可与猪瘟病毒发生交叉反应,这种反应特性可试用于BVDV与猪瘟病毒的鉴别诊断.所制备的4E3与1G11 MAb可以用于BVDV抗原的检测,为建立检测BVDV E2蛋白血清抗体的ELISA奠定了基础.

分类号： S852.65

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