天祝白牦牛Y染色体性别决定基因(SRY)编码区的克隆和原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 裴杰

作者: 裴杰;阎萍;厍睿;程胜利;冯瑞林;梁春年;郭宪;曾玉峰;包鹏甲;朱新书

作者机构:

关键词: 牦牛;Y染色体性别决定基因(SRY);克隆;表达

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1006-1304

年卷期: 2009 年 17 卷 04 期

页码: 67-71

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从天祝白牦牛(Bos grunneins)的基因组DNA中扩增了Y染色体性别决定基因(SRY)编码区序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,天祝白牦牛SRY基因编码区长687bp,编码229个氨基酸(GenBank:FJ373272);对牦牛和奶牛(B. grunneins)的SRY基因编码区进行序列比对,发现存在2个碱基的变异,造成1个氨基酸的变异;将牦牛SRY基因编码区连接至pET-28a(+)载体,成功地构建了表达载体pET-28a/SRY;把表达载体pET-28a/SRY转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG在30℃200r/min条件下诱导,获得了SRY蛋白的大量表达;对表达产物进行Western blot检测,结果显示获得的蛋白能与抗-His单抗特异性结合,确定了牦牛SRY蛋白的表达。

分类号: S823

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