分枝杆菌分型三重PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 娄忠子

作者： 娄忠子;刘聪暖;贾万忠;周继章;闫鸿斌;曹小安;李立;李兆才;付宝权

作者机构：

关键词： 分枝杆菌;结核分枝杆菌;牛分枝杆菌;三重PCR;初步鉴定

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2016 年 43 卷 01 期

页码： 8-15

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究旨在建立一种快速鉴定分枝杆菌的三重PCR方法,并比较分析其在临床检测中的可靠性。根据已发表的结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌rv3036c基因,结核分枝杆菌rv1970f基因(RD7)和牛分枝杆菌pncA基因的序列,改造并设计合成了3对特异性扩增引物,建立了一种能对分枝杆菌样品进行初步鉴定的三重PCR方法。结果显示该方法可针对rv3036c、rv1970f和pncA基因分别扩增出大小为500、125和249bp的目的片段,能特异性检测出结核分枝杆菌(500和125bp两条带)和牛分枝杆菌(500和249bp两条带),并可将结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与其他分枝杆菌加以区分。本方法的检测灵敏度为50pg/μL模板基因组DNA。对86株抗酸染色阳性菌进行三重PCR鉴定,鉴定结果与细菌16SrDNA和ITS序列测定结果一致,检测准确度为100%,优于生长特征和生化试验鉴定。

分类号： S852.618

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