猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ部分基因片段的体外表达与初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 彭小华

作者： 彭小华;何孔旺;陆承平

作者机构：

关键词： 胸膜肺炎放线杆菌;毒素Ⅳ;表达;间接ELISA

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2005 年 13 卷 05 期

页码：

收录情况： CSCD

摘要： 参照GenBank中的猪胸膜肺炎放线杆菌(A ctinobacillus pleuropeum oniae,App)血清1和3型菌株序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增毒素Ⅳ(A pxⅣ)基因3'端1096bp的目的片段,然后克隆到pM D18-T载体中,转入大肠杆菌(Es-cherichia coli)的宿主菌D H5α中,提取阳性克隆质粒进行双酶切和测序鉴定,将T-载体中切下目的片段定向克隆到pET32a(+)中,转入E.coli BL21(D E3),经IPTG诱导可表达分子量约60kD的蛋白,免疫转印鉴定呈阳性,A pxⅣ基因体外成功表达。以纯化的表达产物包被ELISA板,初步检测了一些血清样品,结果预示表达的蛋白可用于区分灭活疫苗免疫和野毒感染。

分类号： S852.61

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