栉孔扇贝精子膜蛋白的提取分离及初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘丽燕

作者： 刘丽燕;杨爱国;王清印;周丽青;刘志鸿

作者机构：

关键词： 栉孔扇贝;精子膜蛋白;糖蛋白;脂蛋白

期刊名称： 海洋水产研究

ISSN： 1000-7075

年卷期： 2008 年 29 卷 02 期

页码： 75-83

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过SDS-PAGE电泳,从提取液的倍数、提取时间、Triton X-100的浓度、SDS的有无等4个方面对提取条件进行优化,确定栉孔扇贝精子膜蛋白的最佳提取条件是:将精液150g离心去除精原细胞,0·1mol/L PBS缓冲液清洗两次,0·1mol/L Tris-HCl缓冲液清洗两次,3000g离心10min(4℃)得精子悬液;然后向精子悬液中加入3倍体积含1%Triton X-100和0.1%SDS的膜蛋白提取液中冰浴振摇1·5h;4℃,50000g离心15min,收集上清精子膜蛋白溶液。SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝R-250染色检测出22种膜蛋白,分子量在23~156kDa之间,PAS染色检测出糖蛋白有13种,苏丹黑B染色检测出脂蛋白有12种,其中既为糖蛋白又为脂蛋白的有8种。此研究结果可为以后进一步分离纯化栉孔扇贝的精子膜蛋白,研究其在精子发生和受精过程中的功能及作用提供基础资料。

分类号： S917.4

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