百合PlAMV和LMoV双重RT-PCR检测体系的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王丽花
作者: 王丽花;杨秀梅;何晓琴;张艺萍;段青;杨舒淇;苏艳
作者机构:
关键词: 百合;双重RT-PCR;车前草花叶病毒(PlAMV);百合斑驳病毒(LMoV)
期刊名称: 农业生物技术学报
ISSN: 1674-7968
年卷期: 2025 年 33 卷 003 期
页码: 670-679
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus, PlAMV)和百合斑驳病毒(Lily mottle virus, LMoV)是目前对我国百合(Lilium spp.)产业危害最严重的2种病毒。为建立上述2种病毒的快速高效检测体系,本研究首先提取百合感病植株总RNA,经逆转录获得cDNA,后以cDNA为模板开展双重同步检测体系优化,并对其特异性和灵敏度等进行检测。结果表明,建立的双重同步检测体系对PlAMV和LMoV的特异性扩增片段大小分别为910和521 bp,对其他常见病毒均无扩增,表明所建立方法特异性强;PlAMV和LMoV的最低检出限分别为967.5 fg和59.0 pg,相比于单基因RT-PCR检测的最低检出限(PlAMV 19.35fg, LMoV 11.8 pg),灵敏度分别降低了50倍和5倍;扩增产物测序片段与不同来源的19个PlAMV分离物和21个LMoV分离物开展BLAST序列分析显示,PlAMV的相似性为86.71%~99.40%,LMoV的相似性为94.75%~99.49%。利用双重同步检测体系对19个田间样品进行检测应用,结果显示,19个样品中有3个样品同时携带PlAMV和LMoV,2个样品携带PlAMV,4个样品携带LMoV,其余10个样品未检出,该结果与基因芯片法检测结果一致。综上所述,本研究所建立的检测体系可同时高效检测PlAMV和LMoV2种病毒,结果可靠,应用前景广阔。
分类号: S436.8
- 相关文献
[1]牛星状病毒及牛环曲病毒双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 王文佳,邓廷贤,赵丽,师志海. 2020
[2]绵羊肺炎支原体和小反刍兽疫病毒双重RT-PCR检测方法的建立. 霍晓丽,李文良,毛立,杨蕾蕾,刘茂军,张纹纹,李基棕,孙敏. 2020
[3]以马铃薯ND2 mRNA为内对照双重RT-PCR法检测马铃薯纺锤块茎类病毒. 马恢,谢晓亮,尹江,温春秀,吴志明. 2007
[4]应用多重RT-PCR方法检测158例猪粪样中的两种冠状病毒. 杨群,何孔旺,陆承平. 2006
[5]双重RT-PCR方法检测花生条纹病毒和黄瓜花叶病毒. 谢宏峰,吴菊香,迟玉成,许曼琳,陈蕾,许婷婷. 2012
[6]吉林、黑龙江毛葱病毒病调查. 刘建青,王永志,周琦,黄淑敏,梁雨欣,张春雨,魏健,程兆伟,李小宇. 2021
[7]牛轮状病毒与病毒性腹泻病毒的双重RT-PCR检测方法的建立. 张俭伟,赵宏坤,杨少华,高运东,王长法,仲跻峰. 2008
[8]甘薯羽状斑驳病毒和褪绿矮化病毒双重RT-PCR检测方法的建立. 许泳清,李华伟,邱思鑫,刘中华,邱永祥,罗文彬,纪荣昌,汤浩,余华. 2014
[9]鸭副粘病毒与H9亚型禽流感病毒双重PCR检测方法的初步建立. 刘宇卓,魏雪涛,李银,张敬峰. 2011
[10]双重RT-PCR快速检测H7N9流感病毒方法的建立. 蒋文明,李金平,于美芳,孙文博,王素春,彭程,侯广宇,刘朔,杜翔. 2015
[11]猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒双重RT-PCR鉴别方法的建立. 刘邓,袁秀芳,徐丽华,牛登元,王朝文,王一成. 2009
[12]兔轮状病毒、兔肠冠状病毒双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 赵巧雅,宋丹丹,刘丽萍,郭效珍,刘存霞,盛媛,史玉颖,黄兵. 2021
[13]鹅星状病毒与新型鸭呼肠孤病毒双重RT-PCR检测方法的建立及应用. 张景辉,武景琦,房立春,刘涛,吴家强,于可响,徐怀英,吕俊峰,艾武,郭慧君,邱建华,亓丽红,宋玲玲. 2024
[14]塞尼卡病毒与口蹄疫病毒双重RT-PCR鉴别检测方法的建立. 刘涛,黄元,陈锦良,向华,肖少波,王晓虎,陈晶,向蓉,何继军,郑海学. 2019
[15]兰花两种主要病毒双重RT-PCR检测方法的建立. 曾燕君,莫饶,刘志昕,王健华. 2009
[16]百合栽培技术要点. 吴青青,胡小京,石乐娟,许红娟. 2015
[17]10个东方百合品种在盐渍化日光温室内栽培表现. 邵小斌,赵统利,朱朋波,汤雪燕,孙明伟,王江英. 2017
[18]百合种球工厂化生产技术. 吴青青,胡小京,石乐娟,张朝君. 2015
[19]百合刺足根螨的发生与防治措施. 张洁. 2013
[20]百合种球活力生理研究进展. 方少忠,张洁,郭文杰,蔡宣梅,游向阳. 2015
作者其他论文 更多>>
-
不同保鲜剂组合对非洲菊切花保鲜效果的影响
作者:杨秀梅;张艺萍;赵阿香;王丽花;瞿素萍
关键词:非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus);保鲜剂;鲜切花;采后预处理;保鲜效果
-
TaqMan探针双重实时荧光定量PCR法同步检测兰花中的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒
作者:孙爱青;王丽花;张艺萍;杨秀梅;许凤;苏艳
关键词:建兰花叶病毒;齿兰环斑病毒;TaqMan探针;RT-qPCR;兰花
-
铁炮百合'萨莉'鳞茎各发育时期及不同组织qPCR内参基因筛选和验证
作者:张达;李莲莲;吴学尉;王天喜;刘海英;李缘;王丽花
关键词:铁炮百合杂交系;内参基因;qPCR;geNorm;百合
-
10种杀菌剂对德国鸢尾茎腐病菌的室内毒力测定
作者:董文志;许凤;蒋亚莲;杨秀梅;汤东生;张艺萍
关键词:德国鸢尾;茎腐病菌;药剂筛选;室内毒力测定;抑制效果
-
云南曲靖和蒙自万寿菊主栽区有害生物调查与分析
作者:张艺萍;杨慈琳;许凤;钱绍方;张丽芳;王丽花;王继华;汤东生
关键词:万寿菊;病害;虫害;草害;调查
-
蝴蝶兰不同部位CymMV和ORSV同步检测及含量比较研究
作者:孙爱青;王丽花;张艺萍;杨秀梅;苏艳;吴学尉
关键词:蝴蝶兰;CymMV;ORSV;检测带毒率;不同部位比较
-
月季新品种蜜月的保鲜技术研究
作者:许凤;赵阿香;华月勇;杨秀梅;王丽花;蒋亚莲;张艺萍
关键词:月季;蜜月;保鲜技术;开花指数;花朵直径