大菱鲆脑细胞系的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张念伟

作者: 张念伟;刘肖峰;王娜;郭华;马佳璐;陈松林

作者机构:

关键词: 大菱鲆;大菱鲆脑细胞系;生长;核型

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2017 年 25 卷 05 期

页码: 820-826

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 鱼类细胞系作为一种重要的研究工具已经被广泛地应用于病毒学、环境毒理学、发育生物学以及生理学等研究中。大菱鲆(Scophthalmus maximus)作为一种重要的海水养殖鱼类,尚未见其脑细胞系建立的报道。本研究通过组织块法,以大菱鲆脑组织为材料,建立了大菱鲆脑细胞系(S.maximus brain cell line,SMB)。培养细胞系所用的培养基是在DMEM/F12基本培养基中添加了4-羟乙基哌嗪乙磺酸(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid,Hepes)、抗生素(青链霉素)、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)和β-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)所配成的完全培养基。SMB细胞由上皮样细胞和成纤维样细胞构成,生长分裂旺盛,至今已传40余代。探究温度对其生长的影响,结果表明,SMB细胞在18~30℃均能正常生长,最适生长温度为24℃。核型分析显示,SMB细胞出现了染色体非整倍性,正常二倍体核型(2n=44t)约占43%。通过脂质体转染法成功的将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因转入SMB细胞中,并成功地获得了表达,转染率约为30%。该细胞系的建立将为大菱鲆致病性病毒的感染机制、基因功能分析等研究提供新的实验材料。

分类号: S917.4`Q2-33

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