文献类型： 中文期刊
第一作者： 李亚军
作者： 李亚军;郝荣增;茹毅;龚真莉;刘艳红;郑海学
作者机构：
关键词： 牛病毒行腹泻病毒;E2-Erns融合蛋白;真核表达;CHO培养;免疫原性
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2023 年 010 期
页码： 1207-1215
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 本研究旨在利用CHO细胞表达系统制备牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）E2-Erns融合蛋白，并分析其免疫原性。以BVDV-1 NADL株基因序列为基础，构建融合表达BVDV E2和Erns蛋白的真核重组表达质粒pcDNA3.1-BVDV-E2-Erns，转染CHO细胞，进行上清分泌表达；离心收集细胞培养上清进行亲和层析纯化，通过SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定纯化蛋白的免疫反应性；使用纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔，通过细胞免疫荧光（IFA）试验和间接ELISA试验鉴定E2-Erns融合蛋白免疫家兔血清的抗体反应性和抗体效价。结果，通过CHO细胞表达系统，成功制备了纯化的BVDV E2-Erns融合蛋白，Western-blot鉴定结果显示，His标签单克隆抗体和BVDV阳性血清均能够与纯化的融合蛋白发生特异性免疫反应。间接ELISA和IFA试验结果显示，一免后第7天血清抗体呈阳性，并持续至免疫后第28天，血清抗体效价水平可达1∶512 000，且该血清抗体可以与MDBK细胞中感染的BVDV发生特异性免疫反应。上述结果表明，本研究成功利用CHO细胞表达系统制备并纯化了BVDV E2-Erns融合蛋白，并通过体内和体外试验证明该融合蛋白具有良好的免疫原性，为BVD的诊断方法及其新型亚单位疫苗研制奠定了基础。
分类号： S852.653
- 相关文献
[1]牛病毒性腹泻病毒Erns蛋白的中华仓鼠卵巢细胞表达及免疫原性分析. 李亚军,茹毅,郝荣增,秦晓东,卢炳州,杨洋,刘华南,张越,龚真莉,刘艳红,余四九,郑海学. 2023
[2]Ⅱ型登革病毒铁蛋白纳米颗粒蛋白的真核表达、纯化及免疫效果评价. 鲍君铎,仇相书,高岩,张佳奇,李霄,金鑫,鲁会军,金宁一. 2024
[3]CHO细胞表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白及免疫原性分析. 李亚军,茹毅,郝荣增,蒋成辉,王伟,张越,张贵才,刘华南,卢炳州,杨洋,陶世宇,杨锐,宋向东,陈娇,余四九,郑海学. 2022
[4]猪视黄醇结合蛋白在毕赤酵母中的表达及检测. 张冬杰,谷溪,杨国伟,刘娣. 2009
[5]二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析. 郑作林,周瀛,杨琼,巩中军,程家安,祝增荣. 2013
[6]生长抑素基因疫苗pES/2SS的构建与表达. 曹少先,何晓红,孙延鸣,刘铁铮,杨利国. 2007
[7]猪大肠杆菌LT基因位点突变、真核表达及小鼠免疫效果. 袁秀芳,王一成,徐丽华,刘邓,牛登元,王朝文. 2010
[8]岭南黄鸡肌生长抑制素基因成熟肽的克隆及酵母表达质粒的构建. 周红蕾,李春玲,王贵平,侯加法. 2008
[9]肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析. 冉旭华,闻晓波,王春仁,刘娣,孙中武,李晓娟,王密. 2011
[10]抗菌肽SMAP-29在毕赤酵母中的表达. 任耀军,薄新文,王新华. 2008
[11]鸡β-防御素-1真核表达载体构建及其在Flp-In-293细胞中的表达. 单艳菊,胡艳,朱春红,束婧婷,丁晶,李慧芳,陈宽维. 2011
[12]日本乙型脑炎病毒NS3蛋白的真核表达及鉴定. 王双双,赵红梅,周丹娜,蔡行,耿超. 2019
[13]日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶抗原表位与霍乱毒素B亚基融合蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞的表达. 徐玉梅,曹士德,朱传刚,张世清. 2019
[14]卵泡抑素基因过表达对其通路上相关基因表达的影响. 孙亚蒙,张冬杰,张旭,汪亮,解宇,刘娣. 2013
[15]绵羊NICD基因的克隆、真核表达及其序列分析. 陈红玲,刘晨曦,孙亚伟,刘明军. 2014
[16]牛杀菌通透性增加蛋白N端在原核和真核细胞中的表达. 姚楠,白杰,张雪梅,吴卫东,李文蓉. 2012
[17]山羊Viperin基因的克隆与真核表达载体的构建. 李照耀,李文良,吴铖楠,李基棕,郝飞,毛立,周斌,江杰元. 2017
[18]日本乙型脑炎病毒NS5rdrp蛋白的真核表达及鉴定. 耿超,赵红梅,周丹娜,蔡行,王双双. 2019
[19]虎源犬瘟热病毒核酸疫苗构建及免疫原性初步研究. 张贺,翟少伦,罗满林,吕殿红,温肖会,魏文康. 2018
[20]鸭疫里氏杆菌OmpA基因真核表达载体构建及免疫效果初步评价. 余波,李婷,徐景峨,张亚楠,姜玲玲,周思旋,卜仕金. 2021
作者其他论文 更多>>
-
非洲猪瘟病毒R298L基因缺失毒株的构建及其致病性与免疫原性评价
作者：范许许;李伟伟;朱兆宇;裴丹诗;王一卓;何路;李熙忠;任青峰;郑海学;朱紫祥
关键词：非洲猪瘟病毒;R298L基因;缺失毒株;致病性;免疫保护
-
硅缺乏调控小新月菱形藻中心碳代谢相关基因的表达
作者：李亚军;何金曼;张秀霞;邓晓东
关键词：小新月菱形藻;硅缺乏;转录组测序;差异表达基因;GO功能分类;KEGG富集分析;中心碳代谢;基因调控
-
非洲猪瘟病毒H108R蛋白的制备及其免疫原性评价
作者：张越;茹毅;郝荣增;杨锐;赵陇和;李亚军;杨洋;张荣;蒋成辉;郑海学
关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV);H108R蛋白;多克隆抗体;免疫原性
-
脯氨酰寡肽酶的研究进展
作者：王姿逸;茹毅;卢炳州;杨洋;马坤;冷非凡;郝荣增;郑海学
关键词：脯氨酰寡肽酶;丝氨酸蛋白酶;酶学活性;非酶学功能
-
口蹄疫病毒非结构蛋白3D的研究进展
作者：翟凤格;聂振宇;张涵;张钊;裴晶晶;郑海学
关键词：口蹄疫病毒;3Dpol;宿主病毒相互作用;药物靶点
-
宿主蛋白HERC4影响口蹄疫病毒复制的作用研究
作者：郑东东;冯涛;郝荣增;杨彪;晏子龙;齐晓兰;郑海学
关键词：口蹄疫病毒;宿主蛋白HERC4;基因敲除;基因过表达
-
基于遗传密码子扩展技术的口蹄疫病毒VP1蛋白位点特异性荧光标记
作者：郝荣增;卢炳州;杨洋;毛玉涵;王姿逸;赵陇和;李亚军;茹毅;郑海学
关键词：蛋白质标记;口蹄疫病毒;VP1蛋白;点击化学;非天然氨基酸
