家兔γ干扰素基因的原核表达及其表达产物的单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 彭伟

作者： 彭伟;宋艳华;胡波;范志宇;魏后军

作者机构：

关键词： 家兔;γ干扰素;原核表达;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 09 期

页码： 939-943

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将PCR扩增的家兔γ干扰素基因克隆至pET-28a(+)原核表达载体上,构建重组载体pET-28a(+)-IFN-γ。重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导、HisTrap亲和柱纯化,获得IFN-γ重组蛋白。以IFN-γ重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术获得4株抗IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为3H8、4G4、4F10、6C12,它们的亚型分别为IgG1、κ链,IgG2b、κ链,IgG1、κ链,IgG1、κ链。分别制备单克隆抗体腹水,结果,4株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10-4~10-5之间。本试验通过制备抗家兔IFN-γ单克隆抗体,为研究和检测IFN-γ提供了一种重要的工具。

分类号： S829.1`Q78

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