基于Taq-Man探针的多重qPCR检测DuCV·DEV·NGPV方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨孟豪

作者： 杨孟豪;李丽湲;肖雅清;刘霞;刘永夏;孟凯

作者机构：

关键词： 鸭圆环病毒;鸭肠炎病毒;新型鹅细小病毒;Taq-Man探针;荧光定量PCR

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2024 年 52 卷 022 期

页码： 178-182

摘要： [目的]建立一种快速、特异的鸭圆环病毒(DuCV)、鸭肠炎病毒(DEV)、新型鹅细小病毒(NGPV)的多重荧光定量PCR方法。[方法]针对DuCV、DEV、NGPV的基因保守区域序列，设计合成3对特异性引物及3种荧光基团标记的Taq-Man探针。构建重组质粒标准品，优化反应条件。建立针对DuCV、DEV、NGPV的多重荧光定量PCR检测方法。[结果]该方法能同时鉴别检测DuCV、DEV、NGPV,并且与其他常见鸭病毒病不发生交叉反应。对DuCV、DEV、NGPV最低检出限均为2.5×10～1 copies/μL。该方法重复性好，组间和组内试验变异系数低于1.0%。用该方法检测150份临床样本，结果显示，DuCV、DEV、NGPV的阳性率分别为32.0%(48份)、23.3%(35份)和18.7%(28份),DuCV和DEV混合感染率为4.6%(7份),DuCV和NGPV混合感染率为8.6%(13份),总阳性率为87.3%(131份),未检出DEV和NGPV混合感染的结果。与常规PCR检测方法比较，阳性符合率为100%。[结论]该研究建立的基于Taq-Man探针的多重荧光定量PCR方法能够同时、快速、定量检测DuCV、DEV、NGPV。较普通PCR更敏感，实用性更强，有效避免了多次检测耗时长、费用高的问题，为DuCV、DEV、NGPV的监测和防控提供了有效可靠的检测技术。

分类号： S852.65

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