应用多重PCR鉴定微生物肥料常用芽孢杆菌

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹凤明

作者： 曹凤明;沈德龙;李俊;关大伟;姜昕;李力;冯瑞华;杨小红;陈慧君;葛一凡

作者机构：

关键词： 多重PCR;种特异引物;鉴定;枯草群芽孢杆菌;微生物肥料

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2008 年 48 卷 5 期

页码： 651-656

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】枯草群芽孢杆菌中枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、解淀粉芽孢杆菌（B．amyloliquefaciens）、地衣芽孢杆菌（B．licheniformis）和短小芽孢杆菌（B．pumilus）是微生物肥料中常用菌种，用传统方法鉴定费时费力，有必要建立检测和鉴定这些芽孢杆菌的种特异性PCR方法。【方法】利用已登录的射rA、rpoA和16S rRNA基因序列分别设计和筛选上述菌种的特异引物并建立多重PCR反应体系。【结果】以基因组DNA为模板，扩增芽孢杆菌、类芽孢杆菌和短芽孢杆菌3属15种的标准菌株（共33株），4个目标种分别产生了大小不同的唯一的产物，除个别种与短小芽孢杆菌引物有交叉反应外，其余参考菌株均为阴性。从23株枯草群菌株的基因组DNA扩增发现，PCR鉴定与常规鉴定结果一致。【结论】本文建立的多重PCR方法具有较好的特异性，可快速准确鉴定枯草群的4个种，在微生物肥料检测方面有良好的实用前景。

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