蜻蜓凤梨AfAP2-1基因的克隆与表达载体构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张静

作者： 张静;张学全;李志英;雷明;徐立

作者机构：

关键词： 蜻蜓凤梨;Af AP2-1;过表达

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2015 年 13 卷 06 期

页码： 1276-1282

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过对蜻蜓凤梨转录组数据的分析,我们获得一个跟拟南芥AP2同源片段,基于此设计引物,利用RACE技术首次从蜻蜓凤梨中克隆到完整的Af AP2-1序列,其c DNA全长2 185 bp,开放阅读框全长1 404 bp,编码467个氨基酸。保守结构域分析其含有两个AP2结构域,属于AP2亚家族。系统进化树分析发现该蛋白与拟南芥的AP2 RAP2.7亲缘关系较近。通过在CDS序列两端分别引入XbaⅠ和KpnⅠ限制性内切酶酶切位点,我们成功构建了Ca MV35S-Af AP2-1-GUS过表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥植株后,再通过GUS染色和RNA水平鉴定发现Ca MV35S-Af AP2-1-GUS已转入拟南芥中并且能正常表达。本研究可为Af AP2-1的功能鉴定奠定基础,对深入研究凤梨科植物开花调控的分子机理具有重要意义。

分类号： S682.36

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