适用于镰刀菌基因敲除和荧光融合蛋白表达的高效通用载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晓亮

作者： 张昊;潘逸;许景升;徐进;冯洁

作者机构：

关键词： 镰刀菌;基因功能;载体构建;USER酶

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2014 年 40 卷 03 期

页码： 106-112

收录情况： 北大核心

摘要： 本文通过使用USER酶克隆技术,构建一系列用于镰刀菌基因敲除和荧光融合蛋白表达,并且操作简单快速的通用载体。在hph基因两侧引入USER酶特异位点,构建了基因敲除载体pKH-KO,可以一步在hph的两侧同时插入上下游同源重组片段;在gfp基因5′端引入USER位点构建了荧光融合蛋白表达载体pKHGFPE和pKNGFPE。此方法构建的载体在插入目的片段时均不用考虑酶切位点,极大地方便了试验设计,并且步骤简单,操作简便,节约大量时间。在大规模进行基因敲除以及相关蛋白定位等基因功能研究上具有广阔的应用前景。

分类号： Q782

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