鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 赵瑞宏
作者: 赵瑞宏;张丹俊;潘孝成;程宝艳;胡晓苗
作者机构:
关键词: 鸭肝炎病毒R85952株;VP1基因;克隆;表达
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2010 年 37 卷 07 期
页码: 69-72
收录情况: 北大核心
摘要: 为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的内引物。以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体。用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达。
分类号: S858.32
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