柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 崔甜甜

作者: 崔甜甜;王艳娇;宾羽;李中安;周常勇;宋震

作者机构:

关键词: 柑橘黄化脉明病毒;RACE;全长cDNA;长链RT-PCR

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2017 年 44 卷 05 期

页码: 944-952

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了建立柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)基因组长链RT-PCR扩增体系,构建其全长cDNA克隆,为深入了解CYVCV分子特性及其致病机理奠定基础。根据GenBank中CYVCV基因组序列和5′RACE扩增结果设计引物。以感染CYVCV的代代酸橙(Citrus aurantium‘Daidai’)植株总RNA为模板进行长链RT-PCR扩增,得到CYVCV全基因组cDNA,克隆至pGEM-Teasy载体,并进行序列测定与分析。结果显示,建立了一步扩增CYVCV全基因组的长链RT-PCR方法,扩增出约7.5 kb的目标片段;所获得的4个CYVCV全基因组cDNA序列与GenBank中已登录的相关毒株的核苷酸序列同源性为93%~99%。

分类号: S666

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