文献类型： 中文期刊
第一作者： 孙树凯
作者： 孙树凯;席飞;郑海学;朱国梁;朱紫祥
作者机构：
关键词： 非洲猪瘟病毒;单克隆抗体;M1249L蛋白
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2025 年 55 卷 011 期
页码： 1502-1508
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 本研究旨在制备非洲猪瘟病毒（ASFV）M1249L蛋白的单克隆抗体并分析其亚型、灵敏性及反应性。首先对M1249L(673～1 249 aa)序列进行密码子优化，并将该片段插入pET-28a载体中，构建原核表达质粒；经过转化、挑取单克隆、诱导表达及蛋白纯化，用纯化后的M1249L截短蛋白免疫小鼠；经细胞融合、有限稀释法筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株，进行亚型鉴定和腹水制备。采用蛋白质免疫印迹（Western-blot）和间接免疫荧光试验（IFA）检测该单抗的反应性。结果显示，该单抗1D6重链属于Ig G1型，轻链为Kappa型，腹水抗体效价可达1∶1 024 000。Western-blot结果显示，该单克隆抗体能够特异性识别ASFV感染后不同时间点猪肺泡巨噬细胞（PAMs）表达的M1249L蛋白以及HEK293T细胞转染不同质粒量后表达的M1249L蛋白。IFA结果显示，在ASFV感染的PAMs细胞中出现绿色荧光，表明有良好的反应性。综上所述，本研究成功制备出M1249L单克隆抗体，为后续研究M1249L蛋白的生物学功能和ASFV诊断检测奠定了基础。
分类号： S852.651
- 相关文献
[1]非洲猪瘟病毒p30蛋白的真核表达纯化及单克隆抗体的制备. 刘靖,钟杰,陈伟业,王晗,张经伟,步志高,华荣虹. 2021
[2]半固体培养法制备非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体. 刘蓓蓓,韦艳娜,陈蓉,谢星,倪博,郝飞,张珍珍,白昀,袁厅,冯志新. 2024
[3]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位定位. 魏天,王成宇,王凤杰,李忠鹏,张芳毓,张守峰,扈荣良,吕礼良,王永志. 2022
[4]非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备. 张萌,刘英楠,谢振华,敖清莹,吕璐,于婉琪,金文杰,秦爱建,扈荣良,陈鸿军. 2021
[5]非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 矫健,李建达,韩先杰,张琳,张玉玉,任素芳,刘飞,陈智,Nataliia Hrabchenko,张文娟,于江,吴家强. 2023
[6]非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立. 张冯禧,肖琦,朱家平,尹力鸿,赵霞玲,严明帅,徐晋花,温立斌,牛家强,何孔旺. 2022
[7]非洲猪瘟病毒pA104R蛋白单克隆抗体的制备与应用. 王露露,皇甫皓月,席飞,张振江,Weldu Tesfagaber,张纪文,黄炼榆,李芳,步志高,赵东明. 2021
[8]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 吕璐,钟秋萍,于婉琪,谢振华,张萌,刘英楠,叶建强,秦爱建,扈荣良,陈宗艳,陈鸿军. 2022
[9]非洲猪瘟病毒抗体竞争ELISA检测方法的建立. 李海,宋煜,吴汉,李桂珍,陈纯,李海涛,邵敏,王晓虎,扈荣良,周鹤峰. 2024
[10]非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 赵亚茹,韩蓉,杨吉飞,牛庆丽,关贵全,罗建勋,刘光远,殷宏,■,刘志杰. 2019
[11]非洲猪瘟病毒H240R蛋白单克隆抗体的筛选与鉴定. 张宁,丁培阳,任东娜,陈艺兰,李雪洋,常泽杰,李青梅,张改平. 2022
[12]非洲猪瘟病毒pI215L蛋白单克隆抗体的制备及其反应性研究. 许文杰,薛梦迪,张元峰,李长尧,黄丽,熊涛,翁长江. 2021
[13]非洲猪瘟病毒D1133L蛋白单克隆抗体抑制其复制. 闫文倩,侯景,杨金柯,郝,雨,杨行,史喜绢,张大俊,别鑫恬,陈国辉,陈玲玲,何路,赵美玉,赵思越,郑海学,张克山. 2024
[14]双抗体夹心ELISA检测ASFV抗原方法的建立与评价. 李其炫,岳慧贤,蒋依倩,张艳艳,陈腾,王述超,张守峰,扈荣良. 2024
[15]非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立. 周改静,罗俊聪,石正旺,万颖,杨波,曹丽艳,宋锐,田宏,郑海学. 2022
[16]猪I类白细胞抗原单克隆抗体的制备及其在非洲猪瘟病毒感染机制研究中的初步应用. 王可欣,Weldu Tesfagaber,王婉,尹丽,孔惠,张振江,李芳,高彩霞,步志高,赵东明. 2025
[17]非洲猪瘟病毒p34蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 王晓,刘传霞,鲍苗菲,李雪雯,李婷婷,陈欣,郑君,翁长江. 2024
[18]非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定. 冯春莹,张朝霞,刘云飞,黄丽,翁长江. 2024
[19]非洲猪瘟病毒pD345L蛋白单克隆抗体的制备及其表位鉴定. 贺筱萍,张元峰,刘学敏,黄丽,翁长江. 2025
[20]非洲猪瘟及防控技术研究现状. 扈荣良,于婉琪,陈腾. 2019
作者其他论文 更多>>
-
非洲猪瘟病毒R298L基因缺失毒株的构建及其致病性与免疫原性评价
作者：范许许;李伟伟;朱兆宇;裴丹诗;王一卓;何路;李熙忠;任青峰;郑海学;朱紫祥
关键词：非洲猪瘟病毒;R298L基因;缺失毒株;致病性;免疫保护
-
口蹄疫病毒非结构蛋白3D的研究进展
作者：翟凤格;聂振宇;张涵;张钊;裴晶晶;郑海学
关键词：口蹄疫病毒;3Dpol;宿主病毒相互作用;药物靶点
-
宿主蛋白HERC4影响口蹄疫病毒复制的作用研究
作者：郑东东;冯涛;郝荣增;杨彪;晏子龙;齐晓兰;郑海学
关键词：口蹄疫病毒;宿主蛋白HERC4;基因敲除;基因过表达
-
基于遗传密码子扩展技术的口蹄疫病毒VP1蛋白位点特异性荧光标记
作者：郝荣增;卢炳州;杨洋;毛玉涵;王姿逸;赵陇和;李亚军;茹毅;郑海学
关键词：蛋白质标记;口蹄疫病毒;VP1蛋白;点击化学;非天然氨基酸
-
非洲猪瘟病毒H108R蛋白的制备及其免疫原性评价
作者：张越;茹毅;郝荣增;杨锐;赵陇和;李亚军;杨洋;张荣;蒋成辉;郑海学
关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV);H108R蛋白;多克隆抗体;免疫原性
-
脯氨酰寡肽酶的研究进展
作者：王姿逸;茹毅;卢炳州;杨洋;马坤;冷非凡;郝荣增;郑海学
关键词：脯氨酰寡肽酶;丝氨酸蛋白酶;酶学活性;非酶学功能
-
我国官方兽医队伍建设现状与思考
作者：刘凡;孟伟;骆双庆;陈慧娟;包世俊;郑海学
关键词：官方兽医;队伍建设;经验做法
