高原牦牛SRY基因的克隆与原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 裴杰

作者: 裴杰;阎萍;程胜利;褚敏;梁春年;郭宪;曾玉峰;包鹏甲;冯瑞林;朱新书

作者机构:

关键词: 牦牛;SRY基因;克隆;表达

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2010 年 26 卷 01 期

页码: 107-112

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为从分子水平了解牦牛的性别形成机制,对高原牦牛SRY(Sex-determining region on the Y chromosome,SRY)基因的编码区进行了克隆表达。以雄性高原牦牛血液为材料,从基因组DNA中扩增SRY基因编码区(单外显子)序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体并测序;将牦牛SRY基因编码区连接至pET-28a(+)载体,构建表达载体pET-28a/SRY;把表达载体pET-28a/SRY转入大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中,在合适的条件下诱导表达;对表达产物进行Western-blot检测。结果表明:牦牛SRY基因(GenBank:EU547257)编码区长687 bp,编码229个氨基酸;成功构建了表达载体pET-28a/SRY,并且SRY蛋白得到了大量表达;Western-blot进一步验证了其表达成功。

分类号: S823.85

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