吉富罗非鱼钙敏感受体基因的克隆、表达与其参与调控细胞凋亡的机制

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李连歌

作者： 李连歌;曹哲明;陶易凡;张丽;马俊蕾;李鸣霄;包景文;朱昊俊;徐跑;强俊

作者机构：

关键词： 吉富罗非鱼;钙敏感受体;基因克隆;缺氧胁迫;细胞凋亡

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2021 年 009 期

页码： 1129-1140

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 钙敏感受体（calcium-sensing recceptor, CaSR）在Ca2+刺激下可参与调控细胞凋亡等生理过程,在机体适应逆境胁迫中发挥重要作用。为研究吉富罗非鱼（Genetically Improved Farmed Tilapia, GIFT）CaSR基因的特点及其在缺氧胁迫下参与细胞凋亡的调控机制。本研究利用RT-PCR技术克隆了吉富罗非鱼CaSRcDNA全长序列,利用qRT-PCR技术分析了该基因在不同组织中的表达模式,并进一步检测了缺氧胁迫下（0.55mg/L）肝脏中该基因和细胞凋亡相关基因mRNA的表达变化,同时利用ELISA法检测了肝脏中抗氧化酶活性的变化,以及通过HE和TUNEL染色法分别观察了肝细胞的形态变化和凋亡情况。结果显示,吉富罗非鱼CaSR cDNA序列全长3265 bp,包括21 bp 5′非编码区、2823 bp开放阅读框和421 bp 3′非编码区,编码940个氨基酸。CaSR基因mRNA在不同组织中均有表达,其中肌肉中表达量最高,肾脏次之;组织切片观察发现缺氧可导致肝脏组织结构损伤,促进肝细胞凋亡;与对照组（5.0mg/L）相比,缺氧可增强SOD、CAT和GSH-Px抗氧化酶活性,上调CaSRmRNA的表达,并引起Bcl-2、Caspase-3和P53凋亡基因mRNA的表达变化。研究结果表明, CaSR可能通过介导Ca2+调控细胞凋亡,从而参与吉富罗非鱼的缺氧应对机制。

分类号： S917.4

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